【摘 要】
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目的:研究Exendin-4调控胰岛β细胞瘤INS-1细胞增殖的机制。方法:使用Exendin-4刺激INS-1细胞,通过Ed U标记染色法检测INS-1细胞增殖率变化,并采用实时半定量PCR法和蛋白质印
【机 构】
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中山市人民医院分子诊断中心,中山市人民医院病理科
【基金项目】
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广东省医学科学技术研究基金资助项目(A2016097);中山市社会公益科技研究项目(2016B1001)
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目的:研究Exendin-4调控胰岛β细胞瘤INS-1细胞增殖的机制。方法:使用Exendin-4刺激INS-1细胞,通过Ed U标记染色法检测INS-1细胞增殖率变化,并采用实时半定量PCR法和蛋白质印迹法检测INS-1细胞Wnt5a基因和蛋白的表达。siRNA瞬时转染沉默INS-1细胞Wnt5a基因,通过Ed U标记观察细胞增殖率变化。重组Wnt5a蛋白与Exendin-4共刺激INS-1后Ed U标记观察细胞增殖率变化。结果:Wnt5a在INS-1细胞中基础表达丰度高,Exendin-4显著降低INS-1细胞Wnt5a基因mRNA及蛋白表达水平。siRNA-Wnt5a瞬时转染降低INS-1细胞增殖率。重组Wnt5a蛋白呈浓度依赖性拮抗Exendin-4对INS-1细胞的促增殖效应。结论:Exendin-4通过下调Wnt5a基因表达促进INS-1细胞增殖。
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