共表达新城疫病毒F基因和H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒

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应用RT-PCR扩增出新城疫病毒F48E8株融合蛋白(F)基因,将其克隆入pGEM-T easy vector构建重组质粒pGEM-TF并进行测序确证.分别从pGEM-T和pUCHA切下F基因和H9亚型禽流感病毒F株(A/chicken/china/F/1998)血凝素(HA)基因,通过一系列分子生物学操作步骤插入到质粒pFPV7S中的鸡痘病毒基因组复制非必需片段构建重组质粒p7SHF,其中F基因和HA基因分别由鸡痘病毒启动子PE/L和合成启动子PS调控.最后将P11-LacZ报告基因表达盒插入质粒p7S
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