LncRNA NEAT1促进宫颈癌发展的作用及机制研究

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wmxlg2008
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目的:探讨长链非编码核富含丰富的转录本1(long noncoding RNA nuclear-enriched abundant transcript 1,LncRNA NEAT1)在宫颈癌中的表达,及其对宫颈癌细胞HeLa增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法:选取2018年3月至2020年3月在我院进行外科切除病灶的宫颈癌患者50例作为研究对象,取同期50例因子宫平滑肌瘤(宫颈无任何病变)等良性疾病而切除子宫的正常宫颈组织作为对照,定量反转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测LncRNANEAT1在肿瘤组织与正常组织中的表达。分析LncRNA NEAT1的表达与宫颈癌患者临床病理参数的关系。细胞实验分为3组:正常组:不加任何药物,常规培养;对照组:细胞转染150nmol/L的LncRNA NEAT1-siRNA-NC后,常规培养;实验组:细胞转染150nmol/L的LncRNA NEAT1-siRNA后,常规培养。CCK-8法检测各组细胞的增殖;DNA ladder分析各组细胞DNA的损伤情况;流式细胞术检测各组细胞的细胞周期和细胞凋亡率;裸鼠皮下种植瘤模型检测各组细胞的体内生长能力;Western blot检测各组细胞中磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白激酶(ataxia-telangiectasia mutated kinase,ATM)蛋白表达的水平。结果:与正常组织相比,LncRNA NEAT1在肿瘤组织中的表达明显升高。Lnc NEAT1的相对表达与宫颈癌患者的肿瘤大小、组织学分级相关(均P<0.05);与正常组相比,实验组细胞增殖能力明显下降,DNA出现明显的凋亡“阶梯图谱”,处于G1期的细胞的比例明显下降,处于S期细胞的比例明显升高,形成S期阻滞,细胞凋亡率、细胞中γ-H2AX、ATM蛋白的表达明显升高,差异均具有统计意义(均P<0.05)。结论:在在宫颈癌组织中LncRNA NEAT1的表达明显升高,沉默其表达后,宫颈癌细胞的HeLa细胞的DNA损伤明显,细胞周期被阻滞在S期,体外增殖与体内生长明显受限,细胞的凋亡率明显升高。
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