【摘 要】
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通过原核表达系统表达猪链球菌Sao-M和IdeSsuis基因,并分析其反应原性.根据GenBank数据库发表的序列,利用分子生物学软件设计了2对特异性引物,通过PCR扩增Sao-M和IdeSsuis基
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院,滨州市人民医院产科,山东绿都生物科技有限公司,吉林大学动物医学院
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通过原核表达系统表达猪链球菌Sao-M和IdeSsuis基因,并分析其反应原性.根据GenBank数据库发表的序列,利用分子生物学软件设计了2对特异性引物,通过PCR扩增Sao-M和IdeSsuis基因,经测序分析后,分别克隆到pET28a(+)和pMAL-c2X,构建重组表达质粒pET28a:Sao-M和pMAL-c2X:IdeSsuis,然后将鉴定为阳性的重组质粒分别转入宿主菌BL21和Rosetta2中用IPTG进行诱导表达,通过免疫印迹进行鉴定.实验表明,两种重组蛋白在原核系统中获得了高效的表达,并能与相应的阳性抗血清发生特异性反应.本研究为进一步探究Sao-M和IdeSsuis蛋白生物学功能及其在猪链球菌致病机制上的作用提供了依据.
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