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用过碘酸钠改良法制备酶标抗体，建立了从血液中检测奶牛温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA。试验结果表明：抗体最适包被量为156μg／mL；酶标抗体最适工作浓度为1：400；抗原及酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃、1h；封闭液为5％犊牛血清；底物显色时间为15min；对温氏附红细胞体抗原的最低检出量为6．64μg／mL；全血及带有附红细胞体的红细胞与纯化抗体反应的最大稀释倍数分别为1：160和1：40，可按照此浓度检测血液中的附红细胞体抗原。对该方法进行特异性阻断试验、交叉性试验和重复性试验，结果表