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将去甲万古霉素作为手性选择剂键合到硅胶载体上，制备成一种新型的手性固定相，用该手性固定相拆分5-甲基-5-苯基乙内酰脲．在反相和极性有机流动相中，5-甲基-5-苯基乙内酰脲能够被对映分离．考察了反相流动相模式下流动相组成、柱温、缓冲液pH值和体积流量对拆分的影响．在反相模式下，流动相为V（甲醇）：V（质量分数为2％的三乙胺醋酸（pH5．5））=10：99，体积流量0．6mL／min，柱温20℃时能获得很好的拆分效果．