聚乙二醇共价修饰β-乳球蛋白的合成和分离纯化方法研究

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目的以β-乳球蛋白(β-lactoglobulin B,LG)为模型蛋白,探讨PEG化蛋白质的最佳合成条件和分离纯化方法.方法用不同摩尔比的NHS-PEG-MAL修饰LG,不同反应时间下,进行SDS-PAGE测定.采用ImageMaster图象分析系统定量凝胶中游离蛋白质,评价蛋白质的PEG化程度;采用灌注色谱技术,通过阳离子交换柱分离纯化反应混合物.结果SDS-PAGE法可使游离LG与PEG-LG达到完全分离.LG的PEG化程度随PEG量和反应时间的增加而提高.在最佳合成条件下,PEG化LG的程度接近9
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