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PCR扩增轮状病毒VP4基因和大肠杆菌LTB基因编码区，将其克隆至pET32a载体上，构建pET32a—VP4-LTB质粒，转化大肠杆菌BL21（DE3）．PCR、酶切鉴定后进一步测序，测序结果表明融合基因片段由2637bp组成，为编码879个氨基酸残基的多肽。经IPTG诱导和SDS-PAGE检测发现表达产物分子量约为118．9KD，以包涵体的形式存在。融合蛋白经镍离子螯合次氨基三乙酸（Ni-NTA）亲和层析纯化后免疫小鼠，结果所产生的抗体效价高于单独VP4蛋白的免疫结果但差异不显著（P〉0．5），但与对