【摘 要】
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目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的胎大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvessel endothelial
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目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的胎大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvessel endothelial cells,PMVECs)损伤的调节作用.方法 组织块法培养胎大鼠PMVECs,鉴定.ELISA法检测不同时间和不同浓度LPS作用后PMVECs表达VEGF水平的变化.将胎大鼠肺微血管内皮细胞分为LPS组(加LPS)、VEGF组(加LPS和VEGF)和VEGF抗体组(加LPS和VEGF抗体).MTT比色法测各组不同时间细胞存活率.ELISA法测各组不同时间血栓调节蛋白(Thrombomodulin,TM)、可溶性E-选择素(soluble E-selectin,sE-SLT)的浓度,分别测其与细胞存活率的比值.结果 获得的细胞呈短梭形或多角形,铺路石样排列,第Ⅷ因子相关抗原检测阳性.在作用时间相同的情况下,LPS浓度为0.1至1ug/ml时PMVECs表达的VEGF浓度最高;而不同浓度LPS诱导PMVECs表达的VEGF均在6至12小时达峰值.所有时间点VEGF组细胞存活率都高于VEGF抗体组,但只在24小时以后才有显著性差异.可溶性E-选择素浓度与细胞存活率比在LPS组、VEGF组和VEGF抗体组没有显著性差异,血栓调节蛋白浓度与细胞存活率比亦呈相似的变化.结论 LPS作用后,胎大鼠肺微血管内皮细胞表达VEGF快速达峰然后缓慢下降,其峰值与LPS之间呈现出时间相关性和浓度相关性.VEGF能促进PMVECs增殖,但对血栓调节蛋白和E-选择素的表达没有明显影响.
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