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【摘要】目的：探讨MDSCs定向分化的调控及其在压力性尿失禁中的应用。方法：选取120只健康纯系雌性大鼠，分为2组，每组60只。A组建立尿失禁大鼠模型，不进行细胞注射；B组建立尿失禁模型，然后注射MDSCs。结果：C组大鼠相对于B组大鼠来说，大鼠的最大膀胱容量与漏尿点压都有明显增加，P＜0.05，具有统计学意义。结论：肌源性干细胞注射对于治疗压力性尿失禁有一定应用价值，但是其具体应用效果与方法还需要进一步进行分析研究。
【关键词】MDSCs定向分化；压力性尿失禁
【中图分类号】R4【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2014）08-0098-01
为探讨MDSCs定向分化的调控及其在压力性尿失禁中的应用，本文选取120只健康纯系雌性大鼠进行了相关分析研究，具体结果报告如下。
1资料与方法
1.1 一般资料选取120只健康纯系雌性大鼠，大鼠体重在250g±50g，均在同一条件下饲养。将所有大鼠分为2组，每组60只。A组建立尿失禁大鼠模型，不进行细胞注射；B组建立尿失禁模型，然后注射MDSCs。两组大鼠在性别、体重等一般资料方面均不存在明显差异，P＞0.05，可以进行统计学对比分析。
1.2试验方法
1.2.1坐骨神经横断术先对两组大鼠注射浓度为2%的戊巴比妥进行麻醉，然后将大鼠进行俯卧固定，剔除骶骨体毛，然后在骶骨正中且1cm切口分离脊柱与坐骨肌肉，找到坐骨神经，然后在坐骨神经脊柱起源的远端、阴部神经分支的近端用剪刀剪断坐骨神经2mm。两组大鼠在行坐骨神经横断术后常规饲养2周。
1.2.2肌源性干细胞注射将培养好的肌源性干细胞加入浓度为0.1%的胰蛋白酶液，在常温下进行培养3~5min，使消化液覆盖所有细胞表面，在细胞变形时，加入10%浓度胎牛血清+10%浓度马血清+含有1%青霉素的Ham-F10培养液终止消化，然后将培养液制成单细胞悬液。先对大鼠注射浓度为2%的戊巴比妥进行麻醉，然后将大鼠进行俯卧固定，然后利用碘伏对大鼠下腹进行消毒，沿下腹切开，暴露尿道。进行尿道消毒后，将硬膜外导管插入大鼠尿道，然后对B组大鼠注射肌源性干细胞悬液10μl。
1.3观察指标观察注射2周后，3组大鼠尿动力学变化。
1.4统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计学分析，计量资料采用t检验，用X±S表示，P＜0.05说明具有统计学意义。
2结果
B组大鼠相对于A组大鼠来说，大鼠的最大膀胱容量与漏尿点压都有明显增加，P＜0.05，具有统计学意义。具体结果见表1。
3讨论
压力性尿失禁（SUI）是女性常见疾病，其是指由于各种原因引起盆底肌肉筋膜组织松弛，膀胱及尿道位置发生改变，尿道阻力降低，导致排尿自禁功能出现障碍[1]。而导致压力性尿失禁的主要原因有两个：尿道固有括约肌缺陷及膀胱颈支持功能障碍[2]，其中括约肌缺陷是主要因素，特别是对于老年患者来说，几乎都存在括约肌缺陷。由于括约肌受到损害，受创机体局部肌肉组织就会发生肌肉再生，用以修补受损肌肉组织，形成新的完整的肌肉组织，然而当尿道固有括约肌存在缺陷时，其成肌功能就会出现障碍。因此，专家认为，要想真正的纠正压力性尿失禁，就要首先纠正尿道固有括约肌缺陷，以改善患者成肌功能，从根本上解决压力性尿失禁问题。
表1注射前后大鼠尿动力学变化（X±S）
组别 注射前 注射1周 注射2周
最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O） 最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O） 最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O）
A组（n=41） 1.87±0.10 14.32±0.58 1.85±0.12 14.78±0.61 1.91±0.15 14.12±1.33
B组（n=41） 1.86±0.18 16.58±1.25 2.52±0.18 22.27±1.21 2.96±0.14 25.61±0.45
随着基因技术和组织工程的发展和深入，干细胞移植成为机体肌肉组织修复损伤的重要手段，目前，通过干细胞移植来治疗肌肉组织损伤的研究已经取得了重大进展。MDSCs即Muscle derived stem cells,中文译为肌源性干细胞，肌源性干细胞可以有效分化为骨骼肌成肌细胞、造血细胞、成骨细胞以及成软骨样细胞[3]，其可以有效参与成肌纤维的修复过程，改善肌肉组织功能结构。本研究，将肌源性干细胞注射进尿失禁大鼠模型中，大鼠的膀胱容量和最大漏尿点压力都有明显增加，这就提示我们在进行肌源性干细胞移植后，其可能转化为纤维细胞参与尿道修复过程，从而改变尿道固有括约肌存在缺陷，也就可能在根本上治疗压力性尿失禁。然而，目前其具体作用机制并不完全明确，还需要进一步进行分析探讨。
参考文献：
[1]Yokoyama T, Pruchnic R, Lee JY, et al. Autologous primary muscle-derived cells transfer into the lower urinary tract. Tissue Eng,2011,18（7）:395-404.
[2]Cannon TW, Lee JY, Somogyi G, et al. Improved sphincter contractility after allogenic muscle-derived progenitor cell injection into the enervated rat urethra. Urology, 2013,7（62）:958-963.
[3]涂由兵,李爱斌.肌源干细胞注射治疗压力性尿失禁的研究进展[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,7（32）:6036-6039.
【此论文是河北省卫生厅课题（课题批准编号20110095）的研究成果。】
【关键词】MDSCs定向分化；压力性尿失禁
【中图分类号】R4【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2014）08-0098-01
为探讨MDSCs定向分化的调控及其在压力性尿失禁中的应用，本文选取120只健康纯系雌性大鼠进行了相关分析研究，具体结果报告如下。
1资料与方法
1.1 一般资料选取120只健康纯系雌性大鼠，大鼠体重在250g±50g，均在同一条件下饲养。将所有大鼠分为2组，每组60只。A组建立尿失禁大鼠模型，不进行细胞注射；B组建立尿失禁模型，然后注射MDSCs。两组大鼠在性别、体重等一般资料方面均不存在明显差异，P＞0.05，可以进行统计学对比分析。
1.2试验方法
1.2.1坐骨神经横断术先对两组大鼠注射浓度为2%的戊巴比妥进行麻醉，然后将大鼠进行俯卧固定，剔除骶骨体毛，然后在骶骨正中且1cm切口分离脊柱与坐骨肌肉，找到坐骨神经，然后在坐骨神经脊柱起源的远端、阴部神经分支的近端用剪刀剪断坐骨神经2mm。两组大鼠在行坐骨神经横断术后常规饲养2周。
1.2.2肌源性干细胞注射将培养好的肌源性干细胞加入浓度为0.1%的胰蛋白酶液，在常温下进行培养3~5min，使消化液覆盖所有细胞表面，在细胞变形时，加入10%浓度胎牛血清+10%浓度马血清+含有1%青霉素的Ham-F10培养液终止消化，然后将培养液制成单细胞悬液。先对大鼠注射浓度为2%的戊巴比妥进行麻醉，然后将大鼠进行俯卧固定，然后利用碘伏对大鼠下腹进行消毒，沿下腹切开，暴露尿道。进行尿道消毒后，将硬膜外导管插入大鼠尿道，然后对B组大鼠注射肌源性干细胞悬液10μl。
1.3观察指标观察注射2周后，3组大鼠尿动力学变化。
1.4统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计学分析，计量资料采用t检验，用X±S表示，P＜0.05说明具有统计学意义。
2结果
B组大鼠相对于A组大鼠来说，大鼠的最大膀胱容量与漏尿点压都有明显增加，P＜0.05，具有统计学意义。具体结果见表1。
3讨论
压力性尿失禁（SUI）是女性常见疾病，其是指由于各种原因引起盆底肌肉筋膜组织松弛，膀胱及尿道位置发生改变，尿道阻力降低，导致排尿自禁功能出现障碍[1]。而导致压力性尿失禁的主要原因有两个：尿道固有括约肌缺陷及膀胱颈支持功能障碍[2]，其中括约肌缺陷是主要因素，特别是对于老年患者来说，几乎都存在括约肌缺陷。由于括约肌受到损害，受创机体局部肌肉组织就会发生肌肉再生，用以修补受损肌肉组织，形成新的完整的肌肉组织，然而当尿道固有括约肌存在缺陷时，其成肌功能就会出现障碍。因此，专家认为，要想真正的纠正压力性尿失禁，就要首先纠正尿道固有括约肌缺陷，以改善患者成肌功能，从根本上解决压力性尿失禁问题。
表1注射前后大鼠尿动力学变化（X±S）
组别 注射前 注射1周 注射2周
最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O） 最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O） 最大膀胱容量（ml） 漏尿点压力（cmH2O）
A组（n=41） 1.87±0.10 14.32±0.58 1.85±0.12 14.78±0.61 1.91±0.15 14.12±1.33
B组（n=41） 1.86±0.18 16.58±1.25 2.52±0.18 22.27±1.21 2.96±0.14 25.61±0.45
随着基因技术和组织工程的发展和深入，干细胞移植成为机体肌肉组织修复损伤的重要手段，目前，通过干细胞移植来治疗肌肉组织损伤的研究已经取得了重大进展。MDSCs即Muscle derived stem cells,中文译为肌源性干细胞，肌源性干细胞可以有效分化为骨骼肌成肌细胞、造血细胞、成骨细胞以及成软骨样细胞[3]，其可以有效参与成肌纤维的修复过程，改善肌肉组织功能结构。本研究，将肌源性干细胞注射进尿失禁大鼠模型中，大鼠的膀胱容量和最大漏尿点压力都有明显增加，这就提示我们在进行肌源性干细胞移植后，其可能转化为纤维细胞参与尿道修复过程，从而改变尿道固有括约肌存在缺陷，也就可能在根本上治疗压力性尿失禁。然而，目前其具体作用机制并不完全明确，还需要进一步进行分析探讨。
参考文献：
[1]Yokoyama T, Pruchnic R, Lee JY, et al. Autologous primary muscle-derived cells transfer into the lower urinary tract. Tissue Eng,2011,18（7）:395-404.
[2]Cannon TW, Lee JY, Somogyi G, et al. Improved sphincter contractility after allogenic muscle-derived progenitor cell injection into the enervated rat urethra. Urology, 2013,7（62）:958-963.
[3]涂由兵,李爱斌.肌源干细胞注射治疗压力性尿失禁的研究进展[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,7（32）:6036-6039.
【此论文是河北省卫生厅课题（课题批准编号20110095）的研究成果。】