CRISPR/Cas9技术敲除人前列腺癌PC-3细胞BLM解旋酶基因的研究

来源 :中国细胞生物学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lmnlmnbalance
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BLM解旋酶是人类Rec Q解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用。BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。该研究设计了5个Cas9/Sg RNA载体,并通过T7E1酶筛选出活性最强的Sg RNA3载体,利用脂质体LTX将其与供体载体共同导入前列腺癌PC-3细胞。BLa和Puro抗性筛选及荧光蛋白标记甄别获得带阳性标记的细胞。Western blot及RTq-PCR检测证明,前列腺癌PC-3细胞中的BLM解旋酶基因被成功敲除,为深入研究BLM解旋酶基因在前列腺癌中的作用提供了重要的科学数据。
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