【摘 要】
：
将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET30a-N,将此重组质粒转化到受体菌BL21中,用诱导剂IPTG分别以不
【基金项目】
：
国家重点基础研究发展计划(973计划)
论文部分内容阅读
将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30a的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET30a-N,将此重组质粒转化到受体菌BL21中,用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间进行采样,经处理后做SDS-PAGE、Westem-blot分析,并以此为包被抗原进行ELISA检测,结果发现以终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导,4小时后表达可达到高峰,其大小约为23kD,薄层扫描结果表明该蛋白表达量约占菌体蛋白总量的32%,该蛋白不仅与PRRSV阳性血清能发生
其他文献
从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核衣壳蛋白（N）的质粒扩增出N基因，构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因
为了克隆禽腺联病毒（Avian adeno-associated virus，AAAV）全基因组用于构建基因转移载体研究，以鸡胚致死孤儿病毒（CELO）作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖，将AAAV约4．7k
提取猪瘟病毒石门系强毒株的基因组RNA,用RT-PCR扩增其Erns基因的cDNA,将其克隆到原核表达载体pPROEXTMHTc中,然后转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导,Erns基因获得高效表达.SDS-P
以伪狂犬病病毒SH株细胞培养物为模板,用PCR方法扩增蛋白激酶(PK)基因部分片段,克隆到pCDNA3中,序列测定显示所扩增的PK基因片段长907bp,与PRV NIA-3株的核苷酸同源性为99.6%