【摘 要】
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目的构建猪链球菌2型Δ0948互补株，验证对溶血素分泌和毒力的影响。方法PCR扩增带启动子的SSU05_0948基因序列并连接至pAT18载体构建互补株，Western blot验证表达情况；绘制生长曲线比较互补株和野生株、突变株在不同时期的生长情况；CD1小鼠攻毒模型验证互补株能否恢复突变株毒力；溶血素(SLY)溶血活性及Western blot比较互补株和野生株、突变株不同时间点对SLY蛋白分
【机 构】
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北京医院国家老年医学中心 国家卫生健康委临床检验中心 中国医学科学院老年医学研究院 100730,北京医院国家老年医学中心 国家卫生健康委临床检验中心 中国医学科学院老年医学研究院 100730,北京
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目的构建猪链球菌2型Δ0948互补株，验证对溶血素分泌和毒力的影响。
方法PCR扩增带启动子的SSU05_0948基因序列并连接至pAT18载体构建互补株，Western blot验证表达情况；绘制生长曲线比较互补株和野生株、突变株在不同时期的生长情况；CD1小鼠攻毒模型验证互补株能否恢复突变株毒力；溶血素(SLY)溶血活性及Western blot比较互补株和野生株、突变株不同时间点对SLY蛋白分泌的影响。
结果互补株构建成功但SSU05_0948基因的表达低于野生株；互补株在对数生长期的生长速度明显慢于野生株和突变株，但在平台期一致；CD1小鼠毒力试验证明互补株可以基本恢复突变株毒力；SLY蛋白溶血活性及Western blot实验证明SSU05_0948在对数期早中期可以抑制SLY蛋白的分泌，而在对数期晚期及平台期则不影响SLY蛋白的分泌，互补株可以恢复SLY蛋白的分泌。
结论猪链球菌互补株CΔ0948能够恢复突变株Δ0948的毒力，SSU05_0948影响SLY蛋白的分泌，为猪链球菌防治提供新思路。
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