目的研究天津港保税区企业员工健康素养干预前后健康知识与行为水平变化。方法采用随机抽样的方法随机选择3家企业,分别于2010年和2013年进行2次问卷调查。在2010—2013年这4年间进行健康讲座、知识竞赛、健康橱窗、健康网站等多种形式的健康教育干预。结果 2010年共调查510人,2013年共调查502人。2013年保税区企业员工健康知识与行为水平(82.71%)高于2010年(78.72%),差异具有统计学意义(P<0.05);2013年基本健康知识知晓率(79.68%)以及健康生活方式行为形成率(81.96%)均高于2010年(75.72%,76.69%),差异有统计学意义(P<0.05);基本技能知晓率2013年(92.73%)高于2010年(88.82%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论健康教育干预在提高企业员工健康知识知晓和行为形成水平方面有积极的作用,企业员工健康素养各方面发展不均衡,应有针对性地继续进行健康干预。