【摘 要】
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目的建立一套用于研究和评价抗肝癌血管新生的实验方案。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为细胞模型,以正常胎肝细胞系L02为对照,应用荧光定量的Boyden小室、划痕实验检测肝癌
【机 构】
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解放军八一医院全军肿瘤中心,南京大学医学院附属鼓楼医院病理科,江苏先声药物研发有限公司,南京军区南京总医院博士后流动站,
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目的建立一套用于研究和评价抗肝癌血管新生的实验方案。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为细胞模型,以正常胎肝细胞系L02为对照,应用荧光定量的Boyden小室、划痕实验检测肝癌条件培养基(HCM)、肝癌细胞系HepG2等诱导作用下对HUVEC迁移的影响;应用荧光定量的粘附实验检测上述诱导作用对HUVEC的粘附作用;应用CFSE/PKH-26染色流式细胞术检测上述诱导作用对HUVEC增殖的作用;应用小管形成实验、Matrigel栓实验检测上述诱导作用对HUVEC小管形成行为及对SCID小鼠体内血管新生的影响。结果体外实验显示,HCM能够比正常条件培养基(NCM)更能诱导HUVEC的趋化和迁移运动,差异有统计学意义(P<0.05);HepG2较L02更容易粘附HUVEC细胞,差异有统计学意义(P<0.05);HCM较NCM更能促进HUVEC的增殖,与L02相比,HepG2和HUVEC共培养更能促进人脐静脉内皮的增殖,差异有统计学意义(P<0.05);HCM和/或HepG2与HUVEC共培养均有利于HUVEC形成管型,而NCM和/或L02与HUVEC共培养对HUVEC形成管型无明显影响。Matrigel栓实验显示,HepG2较L02更能促进SCID小鼠体内的血管新生。结论以上一系列改良的体内、外经典实验能够用于抗肝癌血管新生药物的研究和评价。
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