去唾液酸糖蛋白受体H1亚基的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :华中科技大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:made5215210
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目的在原核系统中表达并纯化去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H1亚基,制备兔抗人ASGPR1多克隆抗体。方法以质粒pEA1为模板,设计引物,将聚合酶链反应(PCR)扩增产物H1基因克隆到原核表达载体pET-32c中。接种含H1/pET-32c的菌株BL21单菌落至LB肉汤中,1∶100稀释转种后用1 mmol/L终浓度的异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用Ni^2+螯合柱亲和纯化,用纯化的ASGPR1免疫新西兰兔制备多克隆抗体。结果H1/pET-32c在原核系统中成功表达和纯化出约50.
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