【摘 要】
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目的克隆表达猴B病毒囊膜糖蛋白gD胞外区片段,评价其诊断价值,为猴B病毒快速鉴别诊断技术建立和疫苗研制奠定基础。方法利用PCR扩增gD胞外区基因片段,测序正确后插入原核表达
【机 构】
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西南大学动物科技学院,军事医学科学院实验动物中心
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目的克隆表达猴B病毒囊膜糖蛋白gD胞外区片段,评价其诊断价值,为猴B病毒快速鉴别诊断技术建立和疫苗研制奠定基础。方法利用PCR扩增gD胞外区基因片段,测序正确后插入原核表达载体pET28b（＋）。重组质粒转化至大肠杆菌（BL21）DE3并进行诱导表达。纯化蛋白首先以His抗体和B病毒阳性血清进行鉴定,再用ELISA评价其诊断价值。结果目的蛋白为包涵体,占菌体总蛋白的35%,分子量约为48kD。Western印迹显示,重组蛋白能与猴B病毒阳性血清和His单克隆抗体发生免疫反应;32份标准阳性血清和30份阴性
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