【摘 要】
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利用大肠杆菌原核表达系统对HIV-1 RT蛋白进行表达,纯化以及晶体生长条件的搜索.以PNL4-3为模板,通过聚合酶链式反应扩增出HIV-1 RT蛋白的基因,将扩增出的目的基因克隆到表达
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利用大肠杆菌原核表达系统对HIV-1 RT蛋白进行表达,纯化以及晶体生长条件的搜索.以PNL4-3为模板,通过聚合酶链式反应扩增出HIV-1 RT蛋白的基因,将扩增出的目的基因克隆到表达载体Pet-duet中,构建HIV-1逆转录酶的重组质粒,重组质粒转化表达菌株BL21（DE3）进行诱导表达.HIV-1逆转录酶主要以可溶形式表达,经亲和柱Ni2＋-NTA,阴离子交换柱MONOQ,分子筛进行纯化后获得了蛋白,其纯度达到85%-90%,基本满足了晶体生长条件的要求.对晶体生长条件行了初筛,最终并获得了HIV
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