大肠杆菌JM83精氨酰—tRNA合成酶基因的克隆,测序及表达

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【摘要】

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用聚合酶链反应（ＰＣＲ）以大肠杆菌ＪＭ８３基因组ＤＮＡ为模板，扩增了精氨酰ｔ－ＲＮＡ合成酶基因，将该基因重组到载体ｐＵＣ１８上转化到大肠杆菌ＴＧ１中，得到在转化子中ＡｒｇＲＳ的高表达。精抽液中ＡｒｇＲＳ的氨酰化活力，ＴＧ１和ＴＧ１转化子分别为１．６５Ｕ／ｍｇ。后者为

【作者】

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王恩多陆身楠

【机构】

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中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室

【出处】

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生物化学杂志

【发表日期】

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1995年2期

【关键词】

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精氨酰-tRNA 合成酶基因克隆序列表达 PCR Arginyl-tRNA synthetase Gene cloning Sequence Ex

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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用聚合酶链反应（ＰＣＲ）以大肠杆菌ＪＭ８３基因组ＤＮＡ为模板，扩增了精氨酰ｔ－ＲＮＡ合成酶基因，将该基因重组到载体ｐＵＣ１８上转化到大肠杆菌ＴＧ１中，得到在转化子中ＡｒｇＲＳ的高表达。精抽液中ＡｒｇＲＳ的氨酰化活力，ＴＧ１和ＴＧ１转化子分别为１．６５Ｕ／ｍｇ。后者为前者的１２７倍，ＤＮＡ顺序测定表明，与从大肠杆菌ＪＡ２００中克隆到的ＡｒｇＲＳ基因相比９１３位碱基为Ａ而不为Ｃ，这种变化使ＡｒｇＲＳ的

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