【摘 要】
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目的:检测lncRNA LOC440173在NSCLC组织和细胞中的表达及探讨其对癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:选取河北医科大学第四医院生物标本库中2014至2017年手术切除的72例NSCLC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测NSCLC组织和癌旁组织中,以及6种NSCLC细胞株(H520、H358、A549、HCC827、H1703和H1299)中LOC440173的表达水平;构建LOC440173的敲低及过表达载体,分别转染H520和H1703细胞,应用MTS、克隆形成及Transwell
【机 构】
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河北医科大学第四医院肿瘤研究所,河北石家庄050011;河北省胸科医院呼吸内科,河北石家庄050041
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目的:检测lncRNA LOC440173在NSCLC组织和细胞中的表达及探讨其对癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:选取河北医科大学第四医院生物标本库中2014至2017年手术切除的72例NSCLC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测NSCLC组织和癌旁组织中,以及6种NSCLC细胞株(H520、H358、A549、HCC827、H1703和H1299)中LOC440173的表达水平;构建LOC440173的敲低及过表达载体,分别转染H520和H1703细胞,应用MTS、克隆形成及Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测敲低及过表达LOC440173对NSCLC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,qPCR法检测LOC440173对于EMT过程相关标志物(E-cadherin、N-cadherin及vimentin)mRNA表达水平的影响,WB法检测其对E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的影响.结果:LOC440173在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁组织(P＜0.01),并与淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期和肿瘤大小有关联(P＜0.05或P＜0.01).敲低LOC440173可以抑制H520细胞的体外增殖、迁移和侵袭(P＜0.05或P＜0.01),过表达LOC440173可显著促进H1703细胞的增殖、迁移和侵袭(P＜0.05或P＜0.01).在转录水平上,敲低LOC440173后,E-cadherin的表达水平升高,间充质相关标志物N-cadherin、vimentin的表达水平降低(P＜0.05或P＜0.01);而过表达LOC440173后,E-cadherin的表达水平降低,间充质相关标志物N-cadherin、vimentin的表达水平升高(P＜0.05或P＜0.01).在转录后水平上,LOC440173负向调节E-cadherin蛋白的表达、正向调节N-cadherin的蛋白表达(均P＜0.05).结论:LOC440173在NSCLC组织中的异常高表达可能与NSCLC的发生发展有关,LOC440173可显著提高NCSCL细胞的体外增殖、迁移、侵袭能力,且其作用机制可能与调控EMT相关基因表达有关.
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