LncRNA SNHG9敲除对胶质瘤细胞增殖影响及其作用机制的生物信息学探讨

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yucunjiang

【摘要】

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目的利用CRISPR-Cas9结合流式单细胞分选构建lncRNA SNHG9基因敲除的U251细胞株,检测基因敲除对细胞增殖能力的影响。利用生物信息学分析探讨SNHG9基因发挥功能的可能机制。

【作者】

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叶静静陈天兵

【机构】

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皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室,皖南医学院弋矶山医院中心实验室

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2021年3期

【关键词】

：

CRISPR-Cas9 SNHG9 胶质瘤细胞增殖生物信息学分析 CRISPR/Cas9 SNHG9 glioma cell proliferation b

【基金项目】

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国家自然科学基金青年项目(编号:81901519),安徽省自然科学基金青年项目(编号:1908085QH380)

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目的利用CRISPR-Cas9结合流式单细胞分选构建lncRNA SNHG9基因敲除的U251细胞株,检测基因敲除对细胞增殖能力的影响。利用生物信息学分析探讨SNHG9基因发挥功能的可能机制。方法在SNHG9基因上、下游分别设计一个Cas9作用靶点,将两对单链向导RNA的引物模板退火连接px330-EGFP载体,构建成功的目的质粒共转染U251细胞后,通过流式单细胞分选在96孔板中培养,通过PCR扩增和测序验证筛选得到SNHG9敲除成功的单克隆细胞株并扩大培养。RTCA方法检测SNHG9敲除后细胞增殖能力

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