【摘 要】
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目的研究SV40 T抗原基因对体外培养的人正常黑素细胞的转化作用.方法用阳离子聚合物SofastTM介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体SV40T-pEGFP导入原代培养的正常
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目的研究SV40 T抗原基因对体外培养的人正常黑素细胞的转化作用.方法用阳离子聚合物SofastTM介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体SV40T-pEGFP导入原代培养的正常人黑素细胞进行稳定表达,G418筛选出阳性克隆,挑独立的单克隆扩大培养,检测SV40T抗原基因及SV40T蛋白在黑素细胞内的表达.结果分离获得转化细胞阳性克隆,提取DNA及RNA后用PCR法成功扩增出288 bp的片段,免疫组化及蛋白质印迹结果证实,转染黑素细胞核内有SV40T蛋白表达.结论SV40T抗原基因可以成功诱导人黑素细胞的转化.
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