BCG-CpG-DNA制备、理化特性及免疫刺激活性的初步研究

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【摘要】

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采用机械破碎、CTAB沉淀、酚:氯仿:异戊醇抽提法从卡介菌(BCG)中制备BCG-CpG-DNA,经化学方法确定其理化成分,通过双抗体夹心ELISA法检测小鼠IgM水平检测其免疫刺激活性.结果

【作者】

：

赵爱华贾淑珍乔来艳寇丽杰王国治

【机构】

：

中国药品生物制品检定所

【出处】

：

微生物学免疫学进展

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

BCG-CpG-DNA 卡介菌(BCG) CpG基序

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采用机械破碎、CTAB沉淀、酚:氯仿:异戊醇抽提法从卡介菌(BCG)中制备BCG-CpG-DNA,经化学方法确定其理化成分,通过双抗体夹心ELISA法检测小鼠IgM水平检测其免疫刺激活性.结果显示每克半干重的卡介菌提取BCG-CpG-DNA约0.9mg.提取物主要成分为BCG-CpG-DNA,分子量大小在3 000～15 710 bp,含少量的多糖和蛋白;紫外分光扫描在260nm有最大吸收;对特异性识别DNA长链的CCGG中的CpG位点的限制性内切酶HpaⅡ高度敏感;能够活化小鼠B细胞产生IgM.所制备的

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