【摘 要】
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JAZ1基因是编码TIFY家族JAZs蛋白的基因之一.为克隆高粱SbJAZ1基因及研究其响应胁迫表达特性,本试验以高粱品种BTx623为研究材料,提取其总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板扩
【机 构】
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贵州大学农学院,贵州贵阳550025茅台学院资源环境系,贵州遵义564507;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;国家小麦改良中心贵州分中心,贵州贵阳550025;
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JAZ1基因是编码TIFY家族JAZs蛋白的基因之一.为克隆高粱SbJAZ1基因及研究其响应胁迫表达特性,本试验以高粱品种BTx623为研究材料,提取其总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板扩增SbJAZ1基因,并对其进行生物信息学、基因表达和原核表达分析.结果 显示,SbJAZ1基因全长606 bp,编码201个氨基酸,蛋白质等电点为7.70,分子量大小为21.15 kDa;SbJAZ1与玉米相应同源基因亲缘关系最近,为亲水性蛋白;二级结构中α螺旋占25.37％、延伸链占9.95％、β转角占4.98％,无规则卷曲占59.70％.qRT-PCR分析表明,SbJAZ1在高粱根、茎、芽和叶组织中均有表达,且具有组织表达特异性,在茎中表达量最高;茉莉酸(JA)处理1h后,SbJAZ1在高粱茎中表达量最高;吲哚乙酸(IAA)和PEG-6000可诱导SbJAZ1的表达.原核表达结果显示,SbJAZ1在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株诱导表达的最佳条件为:温度30℃,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.8mmol·L-1.本研究结果为SbJAZ1基因的生物学功能研究提供了基础.
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