【摘 要】
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目的构建携带N末端Strep（NS）蛋白标签的表达载体;在表达载体中构建衣原体RNA聚合酶亚基重组蛋白并表达.方法采用PCR的方法,通过引物引入NS蛋白标签和新的多克隆位点替代pET215-
【机 构】
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南通大学附属第三人民医院临床药学室,南通大学药学院
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目的构建携带N末端Strep（NS）蛋白标签的表达载体;在表达载体中构建衣原体RNA聚合酶亚基重组蛋白并表达.方法采用PCR的方法,通过引物引入NS蛋白标签和新的多克隆位点替代pET215-DH质粒中原有的T7蛋白标签和多克隆位点,选择新引入的NotI酶切位点进行PCR产物的环化自连,转化DH-5α细菌后筛选阳性菌株,PCR法和基因测序法鉴定新构建的表达载体;在新构建表达载体的BamHI和SalI位点之间分别插入衣原体RNA聚合酶核心酶的α、β、β′亚基,获得表达NS-α、NS-β、NS-β′融合蛋白的表
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