【摘 要】
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目的以大鼠为实验对象,研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响.方法改良Seglen门静脉-下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞.分别将肝细胞按B程序(
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目的以大鼠为实验对象,研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响.方法改良Seglen门静脉-下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞.分别将肝细胞按B程序(渐进式降温程序:-1.5 ℃/min至-18 ℃,保持5 min,-20 ℃/min至-80 ℃,投入液氮保存);C程序(慢速线形冷冻程序 :-2.5℃/min至-80 ℃,投入液氮保存)进行处理.2组冻存细胞分别在液氮中冷藏3、15、30 d后,40 ℃水浴复苏.检测复苏肝细胞活率、形态结构、蛋白质合成功能的改变.结果 (1)B组、C组冻存后各时间点细胞活率及3H-亮氨酸合成量较新鲜组(A组)均有明显下降(P
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