LA—PCR快速克隆传染性法氏囊病病毒基因组A节段全长cDNA方法的建立

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:meng20040511
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从浙江省某鸡场暴发疑似传染性法氏囊病(IBD)的法氏囊病料中分离到1株致死率高达70%的强毒株(IBDV-ZJ2000)。通过筛选,采用效果最理想的蛋白酶K法从法氏囊中提取病毒基因组RNA,经LiCl纯化后,优化各种反应参数和条件,建立了Long-accurate PCR(LA-PCR)一步直接扩增IBDV A节段全长cDNA的方法,得到一约3.26kb的片段。LA-PCR法能快速从病鸡法氏囊和细胞适应毒中扩增A节段全长cDNA,为研究各IBDV毒株A节段的结构和功能打下了基础。
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