重组人硫氧还蛋白及其活性检测

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目的:采用基因克隆技术及原核表达技术重组人硫氧还蛋白(TRX),并证实重组TRX具有二硫键还原酶活性。方法:从人睾丸互补DNA(cDNA)文库克隆出人的TRXcDNA,采用限制性酶切方法构建pQE-32/TRX原核表达质粒,并在大肠杆菌M15中进行稳定表达,应用TALON金属螯合树脂纯化重组人TRX蛋白。用West-ern印迹方法鉴定重组人TRX,并检测TRX的二硫键还原酶活性。结果:(1)克隆的人TRXcDNA序列与基因库(GeneBank)(X54539)序列比较,可译框架完全相同; (2)原核表达载
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