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目的构建p53-EGFP、Nanog-mcherry双荧光标记细胞系,对小鼠胚胎干细胞内p53、Nanog蛋白表达水平进行实时、定量追踪。在此基础上,初步探讨p53在小鼠胚胎干细胞中的作用。方法利用CRISPR-Cas9基因敲入系统分别将外源荧光蛋白表达基因插入到p53、Nanog基因组终止密码子后方,实现p53-EGFP、Nanog-mcherry融合表达。通过荧光强度分析,克隆形成能力检测等方法探索p53在小鼠胚胎干细胞中的作用。结果本研究成功构建了小鼠胚胎干细胞p53-EGFP、Nanog-mche