【摘 要】
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目的:用FOXL2编码区片段构建酵母双杂交诱饵质粒并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法:PCR扩增FOXl2编码区DNA片段,克隆入pGBKT7质粒,转化至DH-5ct大量扩增后提取质粒,经PC
【机 构】
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潍坊医学院整形外科医院,潍坊眼科医院,莒县人民医院骨二科
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目的:用FOXL2编码区片段构建酵母双杂交诱饵质粒并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法:PCR扩增FOXl2编码区DNA片段,克隆入pGBKT7质粒,转化至DH-5ct大量扩增后提取质粒,经PCR、酶切和测序验证,再转化至Y187酵母菌株中用缺陷培养基筛选并进行自激活和毒性检测。结果:获得FOXL2基因1137bp片段,并成功将人类正常和一突变型FOXL2编码区克隆入pGBKT7中,经检测在SD/-Trp/X—a—Gal单缺培养基平板上无蓝色菌斑出现,在SD/-Ade/-Trp培养基平板无生长。同时
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