RNAi沉默转基因油菜fad2基因表达的种子特异性分析

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为研究RNAi沉默转基因油菜fad2基因表达的效果及其器官特异性,实时荧光定量PCR法分析比较了转基因油菜W-4与非转基因对照Westar开花后第7天、第14天、第21天、第28天的种子以及越冬期油菜根、茎、叶器官中的ad2基因的相对表达量.结果显示:对照Westsr种子中fad2基因的相对表达量随开花后的天数呈逐渐增加的趋势,但W-4种子中ad2基因的相对表达量在开花后第21天、第28天较对照Westar显著下降,降幅达到60%.说明转基因油菜W-4在种子发育过程中表达的fad2基因的dsRNA干扰了fad2基因表达.W-4与Westar在越冬期根、茎、叶器官中fad2基因的相对表达量基本一致,无显著性差异.脂肪酸组成分析结果显示:W-4种子中油酸平均含量达到81.5%较Westar增加了近15%,而多不饱和脂肪酸平均含量为5.25%,较Westar下降了近70%;但根、茎、叶中的脂肪酸含量二者无显著差异;结果表明转基因油菜中RNAi干扰fad2基因表达具有种子特异性,不干扰其它器官的fad2基因表达.研究还发现转基因油菜fad2基因表达下降的时期与napin基因表达时期同步,均始于开花后21d左右,表明目标基因的表达受napin启动子的准确控制.
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