B型肉毒毒素重链C端基因的克隆与表达

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目的:扩增B型肉毒毒素重链c端基因并将其在大肠杆菌中表达。方法:首先克隆B型肉毒毒素重链c端片段(BoNTB/Hc),经IPTG诱导,在大肠杆菌中进行天然序列的表达。构建原核表达载体pET32/Hc后进行融合蛋白的表达。对5’端引物进行修饰,最终进行N端修饰蛋白的表达。结果:扩增得到的BoNTB/Hc与已知序列同源性达99%,未得到天然序列的表达,获得了融合蛋白和N端修饰蛋白的表达。Western blot鉴定结果表明,融合蛋白和N端修饰蛋白都可以和特异性抗体发生反应。结论:获得了B型肉毒毒素重链c端基因
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