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本试验旨在探索脂质体Lipofectamine^TM2000介导抗猪乙脑病毒(Anti—JEV)载体转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)的最适条件,为构建Anti—JEV转基因胚胎提供供核细胞。从妊娠大白母猪获取10~15cm猪胎儿,采集背部皮肤用于组织块法培养分离PFF。结果显示,细胞培养至P7代,生长曲线正常;P5—7代细胞用于抗猪乙脑病毒载体转染,当质粒DNA量设定为0.35、0.7、1.05μg和1.4μg时,转染率分别为12.75%、36.82%、24.12%和8.85%;当脂质体量设定为0.7、1.