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目的
探讨肾移植患者术后外周血中血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)间接调控内皮细胞血管新生过程的作用和机制。
方法2014年1月至2015年2月收治的23例不合并糖尿病的慢性肾衰竭患者,行肾移植术。术前1 d和术后24 h采集患者空腹肝素抗凝静脉血。密度梯度离心法分离患者术前、术后外周血中EPC,流式细胞术进行EPC鉴定。利用质谱法对培养EPC的条件培养基进行花生四烯酸代谢产物分析,定量分析前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量。条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),定量PCR、蛋白质印迹等方法观察内皮细胞标志物表达情况,体外成管实验验证内皮细胞血管新生能力。
结果流式细胞术鉴定结果显示肾移植患者的EPC表达c-kit、CD31等标志物。质谱检测结果显示条件培养基中含有多种花生四烯酸代谢产物,且术后PGE2含量升高至术前水平的2倍(P<0.05)。条件培养基培养HUVEC后,术后HUVEC高表达CD31和VE-钙黏蛋白,上调倍数约为术前的1.5倍(P<0.01),且形成的完整闭合的二维血管结构明显增多,成血管能力明显增强。用PGE2处理HUVEC,可观察到同样的效果。
结论肾移植患者EPC分泌的PGE2可以促进内皮细胞发生血管新生过程。