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目的:构建pcDNA5/FRT—nanog—deha48真核表达载体,检测其在肝癌SMMC一7721细胞中的表达。方法:通过RT—PCR的方法克隆nanog基因的选择性剪接变异体nanog—delta48全长编码序列。连接人pMDl8一T载体.经鉴定正确后亚克隆入pcDNA5/FRT,构建pcDNA5/FRT—nanog—deha48真核表达载体,测序无误后经脂质体介导转染到SMMC一7721细胞中,通过RT—PCR初步鉴定其在SMMC一7721细胞中的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(M1Tr)法检测转染前后