探讨微小RNA(miRNA,miR)-483-3p靶向G1S特异性细胞周期蛋白E1(CCNE1)对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。
方法选取我院收集的结肠癌和癌旁组织样本作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织miR-483-3p表达;在结肠癌细胞株中采用慢病毒建立对照miRNA和miR-483-3p过表达细胞株(miR-control组和miR-483-3p组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力,采用Tranwell分析两组细胞的迁移能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-483-3p靶基因,并分析靶基因对结肠癌细胞增殖和迁移的影响。采用t检验分析两组间差异。
结果与结肠癌癌旁组织miR-483-3p(1.12±0.21)比较,结肠癌组织中miR-483-3p表达水平(0.37±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.001,P<0.000)。与miR-control组细胞比较,miR-483-3p组细胞增殖显著下降,差异有统计学意义(F=2.891,P<0.05)。与miR-control组细胞(86.32±9.32)%比较,miR-483-3p组细胞划痕愈合率(32.65±6.18)%显著下降,差异有统计学意义(t=4.011,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶基因证实CCNE1是miR-483-3p的靶基因。在miR-control组中,过表达CCNE1蛋白后细胞增殖能力明显高于过表达空载体的细胞,差异有统计学意义(F=3.193,P<0.05),而在miR-483-3p组细胞中过表达CCNE1蛋白后细胞增殖能力较过表达空载体的细胞,差异无统计学意义(F=0.132,P>0.05)。
结论miR-483-3p在结肠癌中表达水平显著下调,导致其靶基因CCNE1表达水平增加,促进了结肠癌的增殖和迁移。