【摘 要】
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目的 探究氯离子通道-3(CIC-3)在黄芪甲苷(ASI)降低高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤中的作用.方法 体外培养HUVECs,使用MTT实验检测不同剂量ASI对HUVECs的影响;并将HU-
【机 构】
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610014 四川省成都市第二中医医院
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目的 探究氯离子通道-3(CIC-3)在黄芪甲苷(ASI)降低高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤中的作用.方法 体外培养HUVECs,使用MTT实验检测不同剂量ASI对HUVECs的影响;并将HU-VECs分为正常对照组、高糖损伤组、低剂量黄芪甲苷组、中剂量黄芪甲苷组和高剂量黄芪甲苷组;通过高糖诱导制成HUVECs损伤模型;以高糖损伤模型为基础,低、中、高剂量黄芪甲苷组再分别加入1、2、4 μmol/ml的ASI处理;采用流式细胞仪检测HUVEC的凋亡率;采用蛋白质印迹实验(WB)检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况;采用WB和实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测黄芪甲苷处理24 h和48 h后氯离子通道(CIC3)蛋白和mRNA表达情况.结果 随ASI使用剂量增加,HUVECs的存活率升高(P＜0.05),但培养24 h和培养48 h存活率差异无统计学意义(P＞0.05).与正常对照组比较,高糖损伤组细胞凋亡率和Bcl-2蛋白相对表达水平、24 h和48 hCIC3蛋白和mRNA相对表达水平均显著升高,Bax蛋白相对表达水平显著降低(均P＜0.05);与高糖损伤组比较,低、中、高剂量黄芪甲苷组细胞凋亡率和Bcl-2蛋白相对表达水平、24 h和48 hCIC3蛋白和mRNA相对表达水平均升高,且呈浓度依赖性(均P＜0.05);与高糖损伤组比较,低、中、高剂量黄芪甲苷组Bax蛋白相对表达水平均降低,且随着剂量增加显著降低(均P＜0.05);正常对照组、高糖损伤组、低剂量黄芪甲苷组培养24 h和培养48 hCIC3蛋白和mRNA相对表达水平均差异均无统计学意义(均P＞0.05);中剂量黄芪甲苷组和高剂量黄芪甲苷组培养48 hCIC3蛋白和mRNA相对表达水平均高于培养24 h(均P＜0.05).结论 ASI可以通过抑制CIC-3的表达,调节HUVECs的凋亡并缓解其损伤.
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