【摘 要】
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目的建立梅毒螺旋体阿奇霉素耐药的分子生物学检测方法。方法为了提高检测的敏感性和特异性,应用套式聚合酶链反应(Nested-PCR)扩增样本DNA;限制性酶切反应检测阿奇霉素耐药
【机 构】
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南京医科大学学报编辑部; 中国医学科学院皮肤病研究所; 中国疾病控制中心性病控制中心; 美国麻省总医院;
【基金项目】
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美国北卡大学合作项目(UNC-CH5-51416);卫生部部属医院临床学科重点项目(2007-2009)~~
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目的建立梅毒螺旋体阿奇霉素耐药的分子生物学检测方法。方法为了提高检测的敏感性和特异性,应用套式聚合酶链反应(Nested-PCR)扩增样本DNA;限制性酶切反应检测阿奇霉素耐药突变;并对PCR产物和酶切产物进行测序以验证实验结果。结果套式PCR能很好地扩增样本DNA,耐阿奇霉素的菌株经酶切后形成188bp和440bp两个片段,而不耐药者不发生酶切反应。测序结果显示,耐药者的2058位DNA从A突变为G,而野生型者无此突变。结论利用套式PCR和限制性酶切分析法,成功建立了梅毒螺旋体阿奇霉素耐药的分子生物学检测方法 ,为梅毒螺旋体的耐药监测以及进一步的分子流行病学研究,提供了实验室基础。
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