【摘 要】
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去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10),是一种能够水解30余种跨膜蛋白质的"脱落酶"(sheddase),参与诸多生理过程和致病机制,如胚胎发育、细胞粘附、信号转导、免疫反应、癌症和阿
【机 构】
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福建医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学系,细胞与发育工程研究中心,干细胞工程与再生医学福建省高校重点实验室,福州,350004
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去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10),是一种能够水解30余种跨膜蛋白质的"脱落酶"(sheddase),参与诸多生理过程和致病机制,如胚胎发育、细胞粘附、信号转导、免疫反应、癌症和阿尔茨海默病.迄今,已报道的ADAM10完全基因敲除小鼠和大脑神经前体细胞特异性ADAM10基因敲除小鼠分别于胚胎期或围产期死亡,致使无法研究成年小鼠大脑神经细胞ADAM10基因的功能.文章利用本研究小组建立的CaMKIIα-Cre转基因小鼠与ADAM10loxP/loxP转基因小鼠杂交,获得了CaMKllα-Cre/ADAM10loxP/loxP小鼠,并对其进行鉴定.利用PCR方法检测成年ADAM10 cKO小鼠大脑基因组DNA表明,ADAM10基因缺失主要发生在前脑皮层和海马中.荧光定量PCR检测结果显示,ADAM10 mRNA的表达水平在前脑皮层和海马中分别降低55.7%和60.8%;使用Western blotting方法研究发现,ADAM10成熟蛋白质的含量在前脑皮层和海马中分别减少63%和84.8%.采用免疫组织化学方法检测表明,成年ADAM10 cKO小鼠与野生型小鼠相比,其大脑皮层和海马神经细胞的ADAM10免疫染色明显减弱,而其它细胞如胶质细胞的免疫染色基本一致.总之,文章成功制备了首个存活至成年的大脑神经细胞特异性ADAM10基因敲除(cKO)小鼠,克服了小鼠因ADAM10缺失在胚胎期或围产期死亡的弊端,为研究成年小鼠大脑神经细胞ADAM10基因的功能奠定了坚实的基础.
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