【摘 要】
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(目的)建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A（SVA）抗体血清学方法。（方法）扩增SVAVP2基因和VP3基因（VP23基因），并与原核表达载体pGEX-6p-1相连，IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白，经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白，通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定，建立了SVA抗体间接ELISA方法。（结论）扩增出VP23基因全长1569bp，sVP23蛋
【机 构】
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河南省动物疫病预防控制中心/河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室
【基金项目】
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河南省科技创新领军人才（No:204200510012）,河南省现代农业产业技术体系课题（豫财科[2020]92号）
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(目的)建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A（SVA）抗体血清学方法。（方法）扩增SVAVP2基因和VP3基因（VP23基因），并与原核表达载体pGEX-6p-1相连，IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白，经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白，通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定，建立了SVA抗体间接ELISA方法。（结论）扩增出VP23基因全长1569bp，sVP23蛋白为58kDa。该方法的S/P临界值标准为0.35，批内批间变异系数均小于7%，与中和试验结果符合率为95.49%。上述结果表明，该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。
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