白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞株U251增殖抑制和凋亡的实验研究

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目的研究白藜芦醇在体外对胶质瘤细胞株U251的作用,并探讨其潜在的调控机制。方法选取处于对数生长期U251细胞分为空白对照组和不同剂量(25 mol/L、50 mol/L、100 mol/L)白藜芦醇组。采用四甲基噻唑蓝(MTT)比色法评估白藜芦醇对U251细胞增殖率的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对U251细胞凋亡的影响;逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测白藜芦醇对U251细胞Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax信使RNA(mRNA)表达水平影响;免疫蛋白印迹法(Western blot)检测白藜芦醇对U251细胞Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达水平影响。结果白藜芦醇作用U251细胞72 h后,MTT检测结果显示空白对照组U251细胞增殖率为(94±5)%,而不同剂量(25 mol/L、50 mol/L、100 mol/L)白藜芦醇组U251细胞增殖率分别为(64±4)%、(43±4)%和(27±2)%,较空白对照组明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示空白对照组U251细胞凋亡率为(4±1)%,而不同剂量(25 mol/L、50 mol/L、100 mol/L)白藜芦醇组U251细胞凋亡率分别为(25±2)%、(55±3)%、(72±5)%,较空白对照组明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR和Western blot检测结果显示与空白对照组比较,不同剂量白藜芦醇组U251细胞Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2表达水平均明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);而不同剂量白藜芦醇组与空白对照组比较,U251细胞Bax表达水平明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可诱导人胶质瘤细胞株U251细胞增殖抑制和凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin/p53信号通路活化相关。
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