人B7-H4慢病毒表达载体的构建

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【摘要】

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目的构建人B7-H4慢病毒表达载体。方法将RT-PCR扩增的B7-H4基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293细胞,包装成人B7-H4慢病毒颗粒。RT-PCR、流式细胞术和We

【作者】

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张俊爱曾今诚王万党赵祖国王志勇徐军发

【机构】

：

广东省医学分子诊断重点实验室,广东医学院检验医学研究所

【出处】

：

广东医学院学报

【发表日期】

：

2014年3期

【关键词】

：

慢病毒 B7-H4 293细胞 PCR技术 lentivirus B7-H4 293 cells PCR

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目的构建人B7-H4慢病毒表达载体。方法将RT-PCR扩增的B7-H4基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293细胞,包装成人B7-H4慢病毒颗粒。RT-PCR、流式细胞术和Western blot鉴定B7-H4在重组慢病毒感染293细胞中表达,50%组织培养感染剂量法（TCID50法）检测重组慢病毒滴度。结果成功构建了pMD18-T-hB7-H4质粒和pEZ-Lv105-hB7-H4质粒。基因测序分析证实人B7-H4编码序列成功整合到质粒载体。TCID50法测定Lenti-hB7-9H4

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