人肿瘤坏死因子衍生物b cDNA的构建与表达

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构建了人肿瘤坏死因子缺失1~7位和102~107位共13个氨基酸编码序列的cDNA,即人肿瘤坏死因子衍生物b(rhTNFαDb),转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导后,目的蛋白的表达量占菌体总蛋白量的30%~60%。其中可溶性rhTNFαDb蛋白约占超声上清总蛋白的40%。经柱层析纯化后,目的蛋白纯度达95%以上。以L929细胞株检测rhTNFαDb的细胞毒活性,测得rhTNFαDb的比活性为2×108IU/mg。较rhTNFα原型提高一个数量级。rhTNFαDb的体内外抑瘤试验也取得了初步结果。
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