【摘 要】
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目的建立丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法。方法采用丙型肝炎病毒基因重组多表位嵌合蛋白作为包被抗原,生物素标记抗原作为桥接抗原,链霉亲和素标记铕
【基金项目】
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广州市科技计划项目(难题招贤2011J5100009)
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目的建立丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法。方法采用丙型肝炎病毒基因重组多表位嵌合蛋白作为包被抗原,生物素标记抗原作为桥接抗原,链霉亲和素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,自建方法的校准品以国家标准血清物质GBW(E)090047为溯源,应用桥式双抗原夹心法建立丙型肝炎病毒抗体时间分辨荧光免疫分析法。结果自建方法在0.031～4.00NCU/ml内,相关系数可达0.99;分析内和分析间变异系数均小于10%;灵敏度可达0.016NCU/ml;校准品的效价比在0.90～1.10,平均回收率为101.47%;与相关疾病的抗原或抗体无明显交叉反应,其表观浓度值均小于0.03NCU/ml;参考值为0.05NCU/ml;符合国家检定标准的要求;37℃恒温箱烘烤7d后检测性能无明显改变;与同类方法学比对符合性好。结论自建方法精密度好,灵敏度高,特异性强,准确性好,线性范围宽,符合率高,能满足临床检测需要。
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