体外培养大鼠脑皮质神经元离心损伤模型的建立

来源 :中华神经外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengk9000
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目的 建立体外培养大鼠脑皮质神经元离心损伤模型,观察离心损伤后神经元的形态学变化和培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化.方法把培养神经元的六孔培养板的孔内,置入与孔大小相当的200目钢网,并在钢网上放置6g重物,通过变速离心培养板,造成神经元损伤的作用.使用倒置相差显微镜,电镜观察损伤后神经元的形态改变,并测量培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化.结果光镜可见神经元破碎、轴索肿胀、轴索球、轴索部分崩解.电镜可见细胞骨架发生变化.从神经元损伤15min后,培养上清液中LDH活性增高.损伤组LDH升高有两个时相,第一峰在30min出现,第二峰在72h出现,损伤后30min,24h,48h,72h,损伤组与对照组同时间相比,LDH含量均有显著统计学意义(P<0.01),第一峰值可能是原发性损伤造成的细胞膜破损,LDH释放量升高引起的,第二峰值可能是继发性损伤导致细胞膜破损,LDH漏出所引起的.结论实验建立的神经元损伤模型操作简便,能较好地模拟脑外伤。

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