摘要 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对8个大白菜品种的过氧化物酶（POD）同工酶进行分析。结果表明，8个品种的POD同工酶酶谱在酶带数、迁移率、酶量（酶带宽窄）及酶活性（酶带深浅）等方面均存在相似性，但也有一定的差异。依酶谱带特征初步将8个品种进行分类，并对其亲缘关系进行了分析。
　　关键词 大白菜；过氧化物酶同工酶；谱带；亲缘关系
　　中图分类号 S634.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2009）05-0008-02
　　
　　同工酶广泛存在于生物界中，它表现出明显的种属、组织和发育阶段的特异性，既是生理指标，又是可靠的遗传标志[1]。过氧化物酶同工酶在高等植物中广泛而大量地存在，具有高度多型性、器官组织特异性和相对稳定性，即同一器官的同一发育时期，POD同工酶酶谱和活性强弱是稳定的，能反映植物的遗传特性[2]。因而同工酶分析技术被广泛地运用于植物的分类鉴定、亲缘关系及矮化砧木的预选、抗寒性和抗病性鉴定等研究领域。笔者采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对潍坊地区普遍栽种的8个品种的大白菜过氧化物酶同工酶进行分析研究，以期在测定同工酶谱带的基础上，探讨以同工酶谱带特征作为大白菜品种鉴定的依据，进一步测定大白菜品种间的亲缘关系。
　　
　　1 材料与方法
　　
　　1.1 试验材料
　　试验材料购于潍坊市农科院蔬菜研究所，共8个品种，分别为：潍白秋冠、潍白-78、潍白-68、潍白ER-60、潍白-45、潍白四号、潍白二号及潍白一号。
　　1.2 试验方法
　　1.2.1 酶液提取。取8个品种大白菜的种子放入培养皿中，加水在培养箱中（15～25℃）黑暗条件下培养4d。分别取叶片（除去叶脉）0.5g，洗净用滤纸吸干水分，剪碎置于预冷的研钵中，加入酶提取液（由蔗糖10mL、电极缓冲液2mL、无离子水8mL组成）1mL，研磨成匀浆，移入离心管中，8 000rpm离心10min，取上清液备用。
　　1.2.2 电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳参照张卫国（2006）等的方法[2-6]，略有改进。染色参照杨太兴（1991）、孟秋峰（2006）方法[7，8]，采用醋酸—联苯胺法，略有改进。染色液的成分为：联苯胺0.5g，冰醋酸3.75mL，4%氯化铵溶液1g，30%双氧水350μL，5