【摘 要】
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构建了CMV驱动及牛生长激素poly A加尾信号修饰的bcl- [ STBX〗2 cDNA 真核表达质粒pCDCB1.随后,采用脂质体转染方法,将扩增并纯化的pCDCB1转染至培养的SPF鸡胚次代单层成纤
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,南京,210095哈尔滨兽医研究所;
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构建了CMV驱动及牛生长激素poly A加尾信号修饰的bcl- [ STBX〗2 cDNA 真核表达质粒pCDCB1.随后,采用脂质体转染方法,将扩增并纯化的pCDCB1转染至培养的SPF鸡胚次代单层成纤维细胞(CEF)内,96h后收集全部贴壁及上清脱落细胞,用Dot blot 检测bcl-2的表达,用流式细胞术测定其细胞凋亡率.结果,pCDCB1转染后96h,bcl-2在CEF中呈高度表达;CEF平均凋亡率为1.14%,明显低于转染空白载体质粒的对照组7.64%的凋亡率,DNA 合成期(S期)细胞为21.58%,也低于对照组.结果证实鸡bcl-2的表达可显著抑制体外培养CEF凋亡进程,其效应与细胞DNA合成和增殖无关.
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