【摘 要】
：
目的 制备一种可用于修复伴有骨关节炎的软骨缺损的兼具软骨再生和炎性微环境调控的水凝胶支架.方法 通过溶剂热法制备锆金属有机框架(Zr MOF),并负载抗炎肽KAFAK,用紫外光交联法制备普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶,将Zr MOF封装于水凝胶内部,通过扫描电镜、溶胀平衡、降解实验和流变力学表征水凝胶的理化性能.以兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作为种子细胞,用活/死细胞染色验证水凝胶的生物活性,测定软骨细胞外基质糖胺聚糖的含量和成软骨标志基因COL
【机 构】
：
400038重庆,陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院关节外科;400016重庆,重庆医科大学医学信息学院
论文部分内容阅读
目的 制备一种可用于修复伴有骨关节炎的软骨缺损的兼具软骨再生和炎性微环境调控的水凝胶支架.方法 通过溶剂热法制备锆金属有机框架(Zr MOF),并负载抗炎肽KAFAK,用紫外光交联法制备普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶,将Zr MOF封装于水凝胶内部,通过扫描电镜、溶胀平衡、降解实验和流变力学表征水凝胶的理化性能.以兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作为种子细胞,用活/死细胞染色验证水凝胶的生物活性,测定软骨细胞外基质糖胺聚糖的含量和成软骨标志基因COL2A1和ACAN及肥大化基因COL10A1的表达.结果 成功将抗炎肽KAFAK负载到Zr MOF,水合粒径为352.5 nm,粒径分布(PDI)为0.29,Zeta电位为(18.27±0.55)mV.普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶封装Zr MOF后,随着Zr MOF含量的增加,扫描电镜观察到孔壁上的小孔越多;溶胀时间缩短,降解速度增加,流变性能改善.抗炎肽KAFAK负载到Zr MOF后再用水凝胶封装,到第21天,有(84.1±5.0)％的释放,显示出对抗炎肽KAFAK较好的缓释作用.活细胞在Gel、Gel-100 Zr MOF 和 Gel-100 Zr MOF@KAFAK 组的存活比率分别为(90.7±5.4)％、(93.5±4.3)％和(91.9±3.1)％,均显示出良好的生物相容性.以兔BMSCs为种子细胞,在成软骨诱导培养7 d和14 d后,Gel-100 Zr MOF@KAFAK组相较于Gel和Gel-100 Zr MOF组糖胺聚糖含量有显著提高(P＜0.05),成软骨标志基因COL2A1、ACAN表达显著升高(P＜0.05),而肥大化基因COL10A1表达显著降低(P＜0.05).结论 成功将负载抗炎肽的ZrMOF封装于水凝胶内部,通过对抗炎肽KAFAK的持续释放控制炎性微环境,产生更多的软骨细胞外基质,有利于维持成软骨表型.
其他文献
1 病例资料 患者女,45岁,因“反复心慌、乏力 1年余”于2020年12月7日就诊于海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院心血管内科.既往于当地多家医院就诊.当地医院12导联心电图及动态心电图均提示心房颤动(以下简称房颤)伴室内传导阻滞、频发室性早搏;心脏彩色多普勒超声示双房、左心室扩大(左心室舒张末期内径6.5 cm),二尖瓣中量反流,三尖瓣中大量反流,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)为30％;冠状动脉造影阴性.根据心脏超声检查结果,在
目的 研究脊髓呼吸相关的膈运动神经元的空间分布位置并比较其与三角肌运动神经元和肋间运动神经元的分布特点差异.方法 采用从外周到中枢的逆行示踪研究策略,在成年小鼠(n=3)同侧膈肌、三角肌、肋间肌微量注射霍乱毒素β亚基(cholera toxin β-subunit,CTB)或伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV),逆行标记支配目标肌肉的脊髓运动神经元,并进一步分析、比较不同脊髓运动神经元的分布特征.结果 CTB和PRV介导的逆行示踪结果显示:成年小鼠膈运动神经元分布在颈髓C3～C6节段
目的 探索stathmin在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激模拟的创面愈合早期炎症反应中,对皮肤成纤维细胞迁移的作用及初步机制.方法 TNF-α刺激人真皮成纤维细胞模拟体外创面愈合早期炎症反应,通过免疫荧光观察TNF-α对伪足生成的影响,细胞划痕实验观察迁移的改变,免疫荧光及Western blot观察TNF-α对stathmin表达的影响;细胞松弛素B刺激细胞和小干扰RNA(siSTMN)干扰stathmin表达后,通过免疫荧光观察伪足的改变,细胞划痕实验观察迁移的变化.结果 TNF-α处理人真皮成纤维
目的 探讨环状RNAcircACTN4(hsa_circ_0050900)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响.方法 利用环状RNA芯片分析4对乳腺癌组织和癌旁组织的circRNA表达谱,并用实时荧光定量PCR验证circACTN4的相对表达水平;用circACTN4过表达质粒及对照质粒分别转染乳腺癌细胞MCF-7/MDA-MB-231,采用CCK-8实验、EdU实验、平板克隆实验、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验研究circACTN4在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用;
目的 探究大黄素抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜作用及其机制.方法 微量肉汤稀释法测定大黄素对MRSA标准株及5种不同地区临床分离株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),绘制抑菌曲线评估其动态抑菌效果;结晶紫染色测定大黄素抑制MRSA生物膜的作用,扫描电镜和激光
目的 构建一种基于三维刚性DNA桥式纳米探针(3D-TPN)的光电化学(photoelectro-chemistry,PEC)传感器,用于DNA甲基化位点分析研究.方法 将二氧化钛(TiO2)悬浮液滴加到ITO电极表面,形成薄膜,通过电位溶出法在TiO2纳米膜表面沉积金纳米粒子(AuNPs),进一步通过Au-S将三维刚性DNA桥式探针固载到电极表面.制备5-甲基胞嘧啶抗体和碲化镉量子点(Ab-CdTe QDs)偶联物.靶序列存在时,5-甲基胞嘧啶与抗体特异性结合,使Ab-CdTe QDs连接到电极表面,与
目的 在前期发现具有肿瘤靶向性的吲哚花菁小分子的结构基础上,对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)水溶性修饰,并评价其理化性质和肿瘤靶向光动力治疗作用.方法 分别以2,3,3-三甲基吲哚、聚乙二醇单甲醚为原料,设计并化学合成PEG修饰吲哚花菁小分子,采用核磁氢谱、质谱等检测、表征其化学结构;通过水溶性比较、光学性质表征、肾脏正常细胞HK-2与肿瘤细胞RENCA摄入比较、细胞活力测试、单线态氧以及细胞活性氧测定等,评价其理化性质与肿瘤靶向光动力作用.结果 通过汇聚合成策略,经过6
目的 观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)对RAW264.7细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制.方法 采用Fura-2荧光探针对RAW264.7细胞质中Ca2+进行荧光染色,使用单细胞荧光钙离子检测仪检测CaSR对巨噬细胞内Ca2+信号的影响;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导细胞炎症模型;采用q-PCR检测IL-1β和IL-18 mRNA表达;ELISA检测IL-1β蛋白含量.结果 CaSR激动剂CaCl2显著增加RAW264.7胞内
目的 探讨mNGS对肺部感染病原体检测价值以及影响因素分析.方法 收集2021年1月-2021年6月本院住院并送检mNGS的肺部感染者19例,记录患者临床资料、mNGS结果以及传统病原学检测结果.结果 mNGS检测阳性率为73.68％,显著高于传统培养(47.37％,P<0.05);mNGS检测出2种及2种以上的病原体比例为52.63％,主要为铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、人类疱疹病毒4型、人类疱疹病毒7型、细环病毒、星座链球菌、肺炎链球菌和白色念球菌.多因素Logistic回归分析显示未发现影响mNGS检
目的 探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms\'tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制.方法 用100 ng/mL IFNγ联合1 μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和N6-甲基腺苷(m6A)相关基因的表达,在HMC3小胶质细胞中转染RNAi慢病毒敲低WTAP,使