【摘 要】
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为构建DEV UL24/C蛋白的酵母双杂交的诱饵载体,本研究以DEV CHv株基因组DNA为模板,经一步法克隆构建pGBKT7-UL24/C诱饵质粒,质粒转化酵母菌株后进行自激活活性检测、免疫印迹
【机 构】
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遵义医学院贵州省普通高等学校传染病与生物安全特色重点实验室,四川农业大学禽病防治研究中心,四川农业大学预防兽医研究所,动物疫病与人类健康四川省重点实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划(2017YFD0500800);四川省科技厅项目(2017JY0014/2017HH0026);遵义市与遵义医学院市校联合基金(遵市科合社字2017/22号);遵义医学院博士启动基金(F-811)
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为构建DEV UL24/C蛋白的酵母双杂交的诱饵载体,本研究以DEV CHv株基因组DNA为模板,经一步法克隆构建pGBKT7-UL24/C诱饵质粒,质粒转化酵母菌株后进行自激活活性检测、免疫印迹检测和毒性检测。结果显示,诱饵质粒pGBKT7-UL24/C插入片段大小为510bp,且未发生基因突变;pGBKT7-UL24/C质粒转化Y2HGold菌株后的自激活检测显示诱饵菌株无自激活活性,免疫印迹检测表明该诱饵菌株成功表达DEV UL24/C蛋白,毒性检测表明该诱饵蛋白对宿主菌Y2HGold无毒性作用。综
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