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首先利用转座因子诱变的方法，分离一些不释放噬菌体的突变子，然后通过Southern印迹方法证明转座因子插入的位置在O139群霍乱弧菌93X11噬菌体基因组中部的Hind Ⅲ大片段上。由此推测93X11噬菌体基因组非必需区位于两侧。采用低熔点胶回收与染色体相邻的Hind Ⅲ B片段，利用体外重组方法使外源基因替代B片段上的0.786kb EcoR Ⅰ小片段，通过同源重组将这种改变的B片段重组到正常的93X11噬菌体基因组B片段位置上。结果表明，这种外源基因并不影响该噬菌体的溶原性和免疫性。由此认为，这一替代区域属93X11噬菌体基因组上非必需区。然后对它进行核酸序列测定。
通过基因重组的方法霍乱弧菌保护性抗原基因ct-B取代了溶原性噬菌体基因组上的非必需区。利用GM1-ELISA方法检测ct-B的表达，结果表明，ct-B表达良好，并且分泌至胞外。重组菌苗免疫家兔后的血清稀释度在1∶40时，能抵抗106CFU/ml毒株的攻击。因此，该重组菌苗可能成为霍乱弧菌很好的菌苗候选株。